Psicothema, 1996. Vol. Vol. 8 (nº 1). 161-166

Mercedes Martín López, Antonio Caño y José Francisco Navarro

En este trabajo evaluamos los efectos de una única administración de dosis altas del neuroléptico atípico sulpiride (100, 150 y 200 mg/kg, ip) o suero salino (grupo control) sobre la conducta agonística en ratones machos, utilizando un modelo de agresión inducida por aislamiento. La mitad de los ratones fueron aislados durante 30 días y empleados como animales experimentales o controles; la otra mitad fueron utilizados como "oponentes", siendo anosmiados temporalmente mediante sulfato de zinc. Treinta minutos después de la administración del fármaco, se llevaron a cabo interacciones de diez minutos entre un animal aislado y un oponente anósmico en un área neutral, grabadas en vídeo para su análisis etológico/conductual mediante ordenador. Los resultados indicaron una disminución significativa de las conductas ofensivas (amenaza y ataque) con las tres dosis utilizadas. Sin embargo, únicamente con la dosis de 100 mg/kg se observó un perfil antiagresivo específico, sin incrementos de la inmovilidad. Dichos resultados sugieren que la consideración de la posible especificidad antiagresiva de los neurolépticos atípicos podría estar en estrecha relación con la dosis utilizada.

Effects of high doses of sulpiride on agonistic behavior in male mice. The effects of a single injection of high doses of sulpiride (100, 150, or 200 mg/kg, ip) or physiological saline (0.9% NaCl) on the agonistic behaviour elicited by isolation in male mice were examined. Half of the animals were housed and employed as experimental or control animals; the remainder were used as ‘standard opponents" and were temporally rendered anosmic by zinc sulphate. Individually housed mice were exposed to anosmic "standard opponents" in a neutral area 30 minutes after the drug administration. These encounters were videotaped and evaluated using an ethologically based analysis. Sulpiride significantly decreased the time spent in offensive behaviours (threat and attack). However, only the lowest dose produced a specific antiaggressive profile characterized by suppression of aggressive behaviour without a significant increase of immobility behaviours. These results suggest that the possible antiaggressive specificity of atypical neuroleptics could be closely related to the dose used.

La mayoría de los antagonistas dopaminérgicos muestran claras propiedades antiagresivas. Sin embargo, difieren entre sí en la especificidad con la que suprimen dichas conductas agresivas. En este sentido, se ha constatado que los fármacos neurolépticos típicos (como el haloperidol) exhiben un perfil antiagresivo inespecífico (Aguilar, Rodríguez-Arias, Miñarro y Simón, 1994; Navarro, Miñarro y Simón, 1992; 1993), mientras que tras la administración de neurolépticos atípicos (como el sulpiride, clozapina o raclopride) se observa un patrón antiagresivo específico, sin afectar significativamente la motilidad (Aguilar, Miñarro, Pérez- Iranzo y Simón, 1994; Garmendia, Sánchez, Azpiroz, Brain y Simón, 1991; Martín-López, Puigcerver, Vera y Navarro, 1993; Navarro, Martín-López y Puigcerver, 1994; Redolat, Brain y Simón, 1991).

El sulpiride es un fármaco neuroléptico perteneciente al grupo de las benzamidas sustituídas, donde se incluyen también fármacos como la sultoprida, tiaprida o metoclopramida (Jenner y Marsden, 1979). Debido a su escasa liposolubilidad, y por tanto a su dificultad para atravesar la barrera hematoencefálica, esté fármaco suele administrarse en dosis altas (Gerlach, 1991). El sulpiride es un antagonista específico de los receptores dopaminérgicos D2, aunque muestra igualmente un alta afinidad por los receptores D3 (Giros, 1991), actuando preferentemente a nivel mesolímbico (Oakley, Hayes y Sheehan, 1991). El efecto preferente del sulpiride sobre estructuras límbicas (relacionado con la acción antipsicótica de los neurolépticos), junto con su escasa actividad en áreas nigroestríadas (relacionada con los efectos extrapiramidales), podría estar favoreciendo una acción antipsicótica específica sin acompañarse de los importantes efectos extrapiramidales provocados por otros neurolépticos típicos como el haloperidol. Por otro lado, a diferencia de otros neurolépticos como la clozapina o el haloperidol, el sulpiride no interactúa significativamente con receptores de otros neurotransmisores, por lo que su perfil atípico no parece relacionarse con el bloqueo serotoninérgico, muscarínico o alfa-adrenérgico (Palomo, 1991).

Aunque en diversas investigaciones en roedores se ha constatado una acción antiagresiva específica tras la administración aguda de dosis bajas/medias de sulpiride (20-80 mg/kg) (Martín-López et al., 1993; Redolat et al., 1991), no existe todavía evidencia experimental respecto a la posibilidad de que dicho perfil antiagresivo específico se mantenga tras la administración de altas dosis de dicho fármaco. Este estudio, pues, fue diseñado para evaluar los efectos de una única administración de tres dosis altas de sulpiride (100, 150 y 200 mg/kg, ip) sobre la conducta agonística en ratones machos utilizando un modelo de agresión inducida por aislamiento, con el fín de intentar delimitar la dosis máxima del fármaco que mantiene la especificidad en su efecto antiagresivo (disminución selectiva de conductas agresivas sin afectar significativamente la inmovilidad).

Método

Animales

Se utilizaron un total de 80 ratones albinos de la cepa OF.1, con una edad de 42 días a la llegada a nuestro laboratorio, adquiridos comercialmente en el "Servicio de Animales de Laboratorio" de la Universidad de Granada. La mitad de los animales (40) fueron utilizados como animales experimentales, siendo alojados individualmente durante un período de 30 días en jaulas transparentes de plástico (Tecniplast-Letica, Madrid), de 24x13.5x13 cm. Tras registrar sus pesos iniciales, fueron distribuídos aleatoriamente a cada una de las condiciones experimentales. Los 40 ratones restantes se utilizaron como oponentes "anósmicos", siendo alojados en grupos de cinco en jaulas de las mismas características que las anteriores. Para todos los animales la comida y bebida se administró "ad libitum". Las condiciones ambientales del laboratorio donde estaban ubicados los animales fueron cuidadosamente controladas, manteniéndose una temperatura (20±2C) y humedad constantes. Igualmente, se les regularizó el ciclo de luz/oscuridad (luz: de 23.00 h a 11.00 h), adaptándolo a nuestro horario de trabajo.

El sulpiride (Dogmatil®, Laboratorios Delagrande, Madrid) fue adquirido comercialmente en ampollas de 100 mg de sulpiride en 2 cc. de excipiente. Se utilizaron cuatro grupos de ratones aislados (n=10 por grupo) que recibieron una única administración de 100, 150, 200 mg/kg de sulpiride (grupos experimentales), o solución salina (grupo control).

Existen importantes evidencias que señalan un papel central del sistema olfatorio en el desencadenamiento de la conducta agresiva en roedores. Así, los ratones a los que se les ha extirpado los bulbos olfativos no manifiestan conductas de ataque, ni siquiera al ser mordidos por sus coespecíficos (Bergvall, Matuszczyk, Dahléf y Hansen, 1991; Denenberg, Gaulin-Kremer, Gandelman y Zarrow, 1973). El procedimiento más corriente utilizado para producir una anosmia (periférica) consiste en administrar sulfato de zinc a través de los orificios nasales, lo que da lugar a una necrosis (reversible) del tejido epitelial nasal (Flanelly y Blanchard, 1982). Posiblemente, la razón por la cual los ratones machos no luchan con sus oponentes reside en que no son capaces de oler una feromona presente en la orina de los ratones, que constituye una especie de señal desencadenante de la conducta agresiva en ratones con un olfato normal (Mugford y Nowell, 1970).

Los animales aislados de los tres grupos experimentales y el grupo control fueron enfrentados a oponentes "anósmicos" (animales agrupados). La anosmia se llevó a cabo introduciéndoles a través de cada orificio nasal 0.025 ml de sulfato de zinc al 4%. La anosmia se efectuó los días 3 y 1 previos a la realización de las pruebas conductuales.

Los encuentros agonísticos entre los animales aislados (experimentales y controles) y los oponentes anósmicos tuvieron lugar en un área neutral. Como zona neutral se utilizó un recipiente de cristal con dimensiones de 50x26x30 cm. Antes de iniciar la prueba conductual se mantenía a los dos animales en extremos opuestos del recipiente durante un período de 1 minuto. Transcurrido dicho período de tiempo, se retiraba el separador y comenzaba la prueba conductual, que duraba 10 minutos. Todos los encuentros agonísticos fueron grabados con una cámara de vídeo para su posterior análisis etológico mediante un programa de ordenador específicamente diseñado para tal fín (Brain, McAllister y Walmsley, 1989).

Todas las pruebas conductuales se realizaron a los 30 minutos de la última administración del fármaco, iniciándose los encuentros agresivos en la segunda hora del período de oscuridad de los ratones. Las diez categorías conductuales analizadas fueron las siguientes:

1 - Cuidado corporal

2 - Escarbar

3 - Exploración no social

4 - Exploración desde una distancia

5 - Investigación social

6 - Amenaza

7 - Ataque

8 - Evitación/huída

9 - Defensa/Sumisión

10 - Inmovilidad

Cada una de estas categorías conductuales representa una suma de diferentes elementos y posturas. Una descripción más pormenorizada de los elementos constituyentes de cada una de las diez categorías conductuales se puede encontrar en Brain et al. (1989) y Martínez, Castaño, Simón y Brain (1986).

La valoración conductual se efectuaba únicamente sobre las conductas exhibidas por el animal prevamente aislado, desestimando las conductas mostradas por el oponente anósmico. Todas las valoraciones se realizaron de forma "ciega", es decir, en ningún momento se conocía a qué condición experimental pertenecía cada animal evaluado.

Para el análisis estadístico de los datos hemos utilizado pruebas no paramétricas. En primer lugar, se utilizó la prueba de Kruskal-Wallis con el fín de establecer comparaciones entre los distintos grupos experimentales. A continuación, se llevaron a cabo comparaciones entre pares de grupos mediante la prueba de Mann-Whitney.

Resultados

En la Tabla 1 se presentan los resultados del efecto de la administración de sulpiride (100, 150 o 200 mg/kg) o solución salina (ClNa al 0.9%) sobre las diez categorías conductuales evaluadas. Dicha tabla ilustra las medianas y los rangos (entre paréntesis) de los tiempos acumulados mostrados por los animales de cada uno de los cuatro grupos.

Para cada una de las categorías conductuales se realizaron análisis de varianzas generales no paramétricos (Kruskal-Wallis), observándose diferencias estadísticamente significativas en las conductas de amenaza (p<0.01), ataque (p<0.01), inmovilidad (p<0.01), cuidado corporal (p<0.01) y exploración a distancia (p<0.05).

Las posteriores comparaciones realizadas entre pares de grupos (Mann-Whitney) confirmaron dichos resultados. En este sentido, se encontró una disminución significativa de las conductas ofensivas (amenaza y ataque) tras la administración de las tres dosis del fármaco, en comparación con el grupo control (p<0.01).

En contraste, se observó un incremento significativo de las conductas de inmovilidad tras la administración de las dos dosis mayores utilizadas (150 y 200 mg/kg), en comparación con el grupo salino (p<0.01) y el grupo de animales que recibieron una dosis de 100 mg/kg (p<0.01).

Por otro lado, se hallaron también aumentos significativos de las conductas de exploración a distancia y exploración no social tras la administración de 200 mg/kg de sulpiride, en comparación con el grupo control (p<0.05). Por último, se apreció asimismo un incremento significativo en las conductas de cuidado corporal tras la administración de las tres dosis del fármaco, en relación con el grupo salino (p<0.01).

Discusión

Como se aprecia en la Tabla 1, los resultados indicaron una disminución significativa de las conductas ofensivas (amenaza y ataque) tras la administración aguda de 100, 150 y 200 mg/kg de sulpiride. Sin embargo, únicamente con la dosis de 100 mg/kg se apreció un perfil antiagresivo específico, sin una disminución concomitante de las conductas motoras. En contraste, con las dosis de 150 y 200 mg/kg se observó un descenso significativo de las conductas agresivas, pero acompañado de un incremento significativo de la "inmovilidad", en concordancia con un perfil antiagresivo inespecífico (ver Figura 1). Estos resultados sugieren que la consideración de la posible especificidad antiagresiva de los neurolépticos atípicos podría estar en estrecha relación con la dosis utilizada, e indican que dosis de 150 mg/kg o superiores de sulpiride producen ya un evidente patrón antiagresivo inespecífico.

Aunque el perfil antiagresivo específico observado con la dosis de 100 mg/kg coincide con los resultados obtenidos previamente en nuestro laboratorio con dosis inferiores del fármaco (40, 60 y 80 mg/kg) (Martín-López et al., 1993), especialmente en relación a la disminución significativa de las conductas de amenaza, en el presente experimento se aprecia una disminución más potente de las conductas de ataque, lo que indica que la dosis de 100 mg/kg muestra un mayor efecto antiagresivo que dosis inferiores, manteniendo aún una nula acción sobre las conductas de inmovilidad. De igual modo, el perfil antiagresivo selectivo encontrado es muy similar al descrito tras la administración aguda de otros neurolépticos atípicos como la clozapina (Garmendia et al., 1991) o el raclopride (Aguilar et al., 1994), y con otros fármacos como la morfina (Espert, Navarro, Salvador y Simón, 1993).

Por otro lado, otras conductas evaluadas que implican también motilidad (v.g., exploración no social o investigación social) tampoco disminuyeron significativamente. Curiosamente, con la dosis mayor utilizada (200 mg/kg), se aprecia un incremento de las conductas de exploración no social, que han sido consideradas por algunos autores como conductas relacionadas con el posible efecto ansiolítico de un fármaco (Greenshaw, Nguyen y Sanger, 1988).

Finalmente, se observa también un incremento significativo de las conductas de cuidado corporal tras la administración de las tres dosis de sulpiride, lo que sugiere que los receptores dopaminérgicos parecen estar implicados en las conductas de "grooming" en ratones de la cepa OF.1, en concordancia con los resultados obtenidos con otras especies (Spruijt, van Hooff y Gispen, 1992). En este sentido, se ha encontrado que la administración de agonistas dopaminérgicos (v.g., RU 24213) produce una abolición casi completa de las conductas de cuidado corporal, mientras que los antagonistas dopaminérgicos (v.g., haloperidol) incrementan significativamente dichas conductas (Martín-López y Navarro, 1994).

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